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饲料中泛酸的测定
1 仪器及试剂
1.1仪 器
1). 分析天平一台（精度0.1mg）；
2). 超声波清洗机一台；
3). 溶剂过滤器（含泵）一套；
4). 微量进样器（100μl）一支；
5). 离心机一台；
6). pH计一台
7). 等度高效液相色谱仪；
1.2试 剂
1). 0.1%的磷酸溶液；
2). 1%的乙二胺四乙酸二钠(EDTA)溶液
3). 磷酸缓冲液
4). 1mol/L的盐酸溶液
5). 1mol/L的氢氧化钠溶液
6). 泛酸钙标准品：含量≥99%
7). 泛酸钙标准贮备液
8). 泛酸钙标准工作液
1.3标准溶液配制
泛酸标准贮备液：准确称取已知浓度的泛酸钙标准品0.02g，置于100ml棕色容量瓶中，用0.1%的磷酸溶解，定容至刻度，摇匀。
泛酸标准工作液液：准确吸取泛酸标准贮备液用水按1:10的比例稀释，现用现配。该溶液浓度为20μg/ml。
磷酸缓冲液：称取3.12 g 二水磷酸二氢钠溶于1L水中，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH为5.5，通过0.45滤膜过滤脱气使用。
2 样品制备
2.1复合预混合饲料：称取试样1-2g 或维生素预混合饲料0.25 -0.5g，精确至0.0001g，置于100 mL棕色容量瓶中。加60 mL水浸湿，摇匀，加10mL l%的二乙胺四乙酸二钠溶液混匀，置于超声波水浴上振荡提取15min。用水定容至刻度混合均匀，过滤或离心。再经0.45μm滤膜过滤，调整溶液的浓度大于1μg/mL，进样测定。
2.2浓缩饲料：称取试样2-5g ，精确至0.00 01g，置于100ml色容量瓶中。加60ml浸湿，摇匀，加10ml l%二乙胺四乙酸二钠溶液棍匀，置于超声波水浴上振荡提取15 min。提取液若出现混浊，需用几滴氢氧化钠溶液和盐酸溶液调节pH至4.5左右，至溶液澄清(用试纸显示)沉淀蛋白质，用水定容至刻度，过滤或离心。再经0.45μm滤膜过滤，进样测定。
3 色谱条件
色谱柱： C18色谱柱 150mm×4.6mm×5μm；
流动相：磷酸缓冲溶液；
流速：1.0ml/min；
温度：室温；
进样量：20μL；
检测波长：200nm。
4 色谱图
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